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凝胶色谱法分离原理(凝胶色谱法)

发布时间:2026-03-23 | 来源:互联网转载和整理

1、凝胶色谱法也叫凝胶过滤、凝胶色谱、凝胶渗透色谱、渗透色谱、分子筛色谱。

2、凝胶色谱是20世纪60年代初发展起来的一种快速简便的分离技术。由于其设备简单,操作方便,不需要有机溶剂,对高分子物质具有较高的分离效果。目前已广泛应用于生物化学、分子生物学、生物工程、分子免疫学、医学等相关领域。它不仅被用于科学实验研究,而且被大规模地用于工业生产。

3、凝胶的类型和性质

4、(1)交联葡聚糖凝胶(葡聚糖凝胶)

5、交联葡聚糖的商标是Sephadex。不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示,G后的***数字为凝胶屈服值的10倍。比如G-25膨胀时每克凝胶能吸收2.5克水,G-200克每千克凝胶能吸收20克水。交联葡聚糖凝胶的类型有G-10、G-15、G-25、G-50、G-75、G-100、G-150和G-200。因此,“G”反映了凝胶的交联度、溶胀度和分割范围。

6、(2)Sephadex LH-20,Sephadex G-25的羧丙基衍生物,溶于水和亲脂性溶剂,用于分离水不溶性物质。

7、(3)琼脂糖凝胶:

8、有很多商品名,如Sepharose (pharmacia,瑞典)、Bio-Gel-A (Bio-Rad,美国)等。琼脂糖凝胶依靠糖链之间的次级链,如氢键,来维持网络结构,网络结构的密度取决于琼脂糖的浓度。一般其结构稳定,可在多种条件下使用(如水、pH为4-9的盐溶液)。琼脂糖凝胶在40以上开始融化,不能高压灭菌,但可以化学灭菌处理。

9、(4)聚丙烯酰胺凝胶:

10、它是一种以丙烯酰胺为单元,由亚甲基双丙烯酰胺交联而成的人工凝胶。将其干燥、粉碎或加工成颗粒,通过控制交联剂的用量可以制成各种类型的凝胶。交联剂越多,孔越小。聚丙烯酰胺凝胶的商业产品是Bio-Gel -P (Bio-Gel P),由美国Bio-Rad工厂生产。型号很多,从P-2到P-300共10种。将P后的数字乘以1000,相当于凝胶的排阻极限。

11、(5)聚苯乙烯凝胶的商业产品Styrogel,具有较大的网状结构,可用于分离分子量为1600 ~ 4000万的生物大分子。适用于有机聚合物、分子量测定和脂溶性天然产物的分类。凝胶具有良好的机械强度,甲基亚砜可用作洗脱剂。

凝胶色谱法的分离原理

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