退火温度一般是多少？

发布时间：2025-08-20 | 来源：互联网转载和整理

唉，这种题就是中国特色，完全理论脱离实际。pcr退火温度是一个范围，一般是50度到65度，或者到70度做两步法pcr。其中，模板的gc含量、模板的组成（单一模板还是cdna还是全基因组dna还是别的什么）等等条件都会影响tm值。没有一个确定的说是多少比较好，都是具体情况具体分析。有的时候引物设计回来，还要做温度梯度测验，设计的tm不一定就是最适合的tm。不得不说这题直接问一个数，纯属是闭门造车，一点实验经历都没有只凭空想，答对了也没有得到任何有用的知识。好了，如果非要说一个数的话，那么习惯上是55度左右。选项中我更倾向于56度的答案。50度还是偏低，对于稍微复杂的模板来说，非特异性扩增的可能是b，生物必修三的玩意！